密理博超濾管，超濾離心管0.5ML分子量 10KD產(chǎn)品概述：

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定。

密理博超濾管，超濾離心管0.5ML分子量 10KD

貨號：UFC501096

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產(chǎn)品目錄：

超濾管 0.5ML 3KD	密理博 Millipore	UFC500396
超濾管 0.5ML 10KD	密理博 Millipore	UFC501096
超濾管 0.5ML 30KD	密理博 Millipore	42410
超濾管 0.5ML 50KD	密理博 Millipore	42416
超濾管 0.5ML 100KD	密理博 Millipore	UFC510096
超濾管 4ML 3KD	密理博 Millipore	UFC800396
超濾管 4ML 10KD	密理博 Millipore	UFC801096
超濾管 4ML 30KD	密理博 Millipore	UFC803096
超濾管 4ML 50KD	密理博 Millipore	UFC805096
超濾管 4ML 100KD	密理博 Millipore	UFC810096
超濾管 15ML 3KD	密理博 Millipore	UFC900396
超濾管 15ML 10KD	密理博 Millipore	UFC901096
超濾管 15ML 30KD	密理博 Millipore	UFC903096
超濾管 15ML 50KD	密理博 Millipore	UFC905096
超濾管 15ML 100KD	密理博 Millipore	UFC910096

 

關(guān)鍵詞：密理博超濾管，超濾離心管0.5ML分子量 10KD

使用注意事項(xiàng)

（1）選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。

（2）新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。

（3）平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機(jī)預(yù)冷至4度）。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后，有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至zui低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī)，否則離心機(jī)出問題時(shí)，無法*時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直）。在實(shí)際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。

（4）當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時(shí)超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。

（5）前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。^[

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